I test di laboratorio per stafilococco, immagini nasali infezione da stafilococco.

I test di laboratorio per stafilococco, immagini nasali infezione da stafilococco.

1. Ottenere un campione di tessuto infetto

2. Gram Colorazione

Un campione clinico è posto su un vetrino e risciacquata con:

  1. Cristallo viola
  2. Iodio soluzione (il mordente)
  3. Decolorizer (etanolo)
  4. Safranina (il di contrasto)
  5. acqua

Dopo questa procedura, S.aureola e altri stafilococchi dovrebbe essere blu, viola o viola sotto il microscopio ottico, ciò è noto come Gram positivo (Gram +), (immagine 1 ). I batteri che sono di colore rosa chiaro sono noti come Gram-negativi (Gram -), (1 ). Colorazione di Gram viene eseguita solo, se mescolato infezione da batteri Gram + e Gram – batteri è previsto.

100x
(Fonte: phil.cdc.gov)

3. Staphylococcus aureus Cultura

Quando si prevede stafilococco, una parte di un esemplare medica si sviluppa su agar triptone soia (TSA) con sangue di montone 5% (BAP = sangue piastra di agar), (2 ). Su tale agar, S.aureola forma colonie giallo dorato (crema bianco all’arancione), (3 ), mentre S.epidermidis forma colonie bianche (immagine 2 ). Cultura di solito ha bisogno 16-18 ore crescere (fino a 48 ore per cultura sangue) a 35 ° C (4 ). S.aureola di solito è emolitica sul sangue di pecora, e S.epidermidis non è. Nei campioni misti, contenenti batteri Gram + e – batteri, un agar Columbia CNA basa piastra (colisitin / acido naladixic) per sopprimere Gram crescita negativa possono essere utilizzati.

4. test enzimatici

b) test di coagulasi. S.aureola (e S.intermedius . che non è patogeno per l’uomo) provoca la coagulazione (coagulo di fibrina) di un plasma di coniglio, quindi è coagulasi positivo. che lo distinguono da tutti gli altri stafilococchi. In test di agglutinazione al lattice (test su vetrino ), Si utilizzano particelle di lattice ricoperte di fibrinogeno e IgG. anticorpi IgG si legano con coagulasi su S.aureola . ciò si traduce in lattice particelle aggregazione in circa 20 secondi (5 ). Questo test vetrino può essere negativo in una piccola percentuale; in questo caso un provetta. che rileva sia libero e coagulasi legata, deve essere eseguita (5 ). Circa il 97% delle risorse umane S. aureus isolati in possesso di entrambe le forme di coagulasi (6 ).

5. diagnosi rapida di Staphylococcus aureus con PCR

Principio di PCR

procedura PCR

Un campione di DNA da stafilococco, polimerasi – un enzima necessario per la duplicazione del DNA, una sequenza di nucleotidi (di primer), necessari per l’avvio della duplicazione, e una grande quantità di nucleotidi liberi sono necessari per la PCR. Polymerase è ottenuto da un batterio Thermus aquaticus (Taq polimerasi). Tutti i componenti vengono aggiunti in un tubo di test, che viene messo in un termociclatore. Dopo alcuni cicli di PCR, elettroforesi su gel di agarosio e la tecnica Southern blotting sono utilizzati per determinare se il DNA ottenuto è S.aureola DNA (8 ).

6. Staphylococcus aureus Detection Kit

Kit per la rilevazione delle varie specie di stafilococchi o loro tossine dai tessuti umani, cibo, latte di mucca, acqua e altre fonti ambientali, sono disponibili in commercio.

Xpert ™ MRSA / Culture SA-Sangue (BC) e Xpert ™ MRSA / SA-Skin e Soft infezione dei tessuti (SSTI) test sono in grado di rilevare simultaneamente MRSA e S.aureola direttamente da colture di sangue e campioni di tessuto molle infetto, utilizzando la PCR. Entrambe le prove hanno dato esito in circa 50 minuti (10 ).

Acqua, per essere testati per S.aureola . è filtrato e quindi la membrana filtrante viene messa in modificata Mannitol Salt Agar per la coltura (14 ).

7. Staphylococcus aureus antibiotico sensibilità di prova

S.aureola da una lesione infetta deve essere coltivate su un mezzo solido e quindi la sospensione appropriata preparato da alcune colonie cresciute. Sospensione con i batteri viene tamponato nel corso di un Mueller-Hinton agar (immagine 3 ), (15 ). Dischi impregnati con vari antibiotici sono collocati su agar e incubate per 24 ore a 35 ° C. Zone di inibizione della crescita batterica, misurata intorno dischi, devono essere confrontati con quelli del Comitato Nazionale per Clinical Laboratory Standards (NCCLS) Documento M100 (M2). I risultati ottenuti possono poi essere riportati come resistenti, intermedio o sensibili.

Immagine 3.S.aureola test di sensibilità agli antibiotici.
Aree di crescita batterica inibiti sono visti in giro dischi antibiotici.
(Fonte: phil.cdc.gov)

Microbiologia Report Form per S. aureus

a) Rapporto di drenaggio da un carbonchio pelle, infettati da S. aureus:

Fonte (posizione anatomica): Drenaggio di ascesso del collo
Colorazione di Gram: Molti cocchi gram positivi. la crescita pesante. Molti globuli bianchi (presenza di globuli bianchi indica infiammazione).
Organismo:Staphylococcusaureola
sensibilità agli antibiotici:

b) Relazione per il sangue, infettati da MRSA:

fonte. sangue
colorazione di Gram. Molti globuli bianchi. Pochi cocchi gram positivi. la crescita della luce.
Organismo. Staphylococcusaureola
sensibilità agli antibiotici :

* L’alta dose di oxacillina era necessario per inibire i batteri, quindi questo è considerato come un stafilococco resistente alla meticillina – MRSA.

c) Relazione del tampone nasale, colonizzata da S. aureus:

fonte. mucosa nasale
colorazione di Gram. Cocchi Gram-positivi. la crescita della luce. Non ci sono globuli bianchi *
Organismo. Staphylococcusaureola
sensibilità agli antibiotici :

* In stafilococco colonizzazione non c’è infiammazione, quindi non i globuli bianchi si trovano sotto il microscopio.

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